做試驗！要檢測3種以上細胞因子或趨化因子？還在一塊ELISA板接著一塊做？費時又費力。還在苦于ELISA檢測多種指標時，樣品寶貴，體積太少，檢測不夠用嗎？還是糾結于現有多因子檢測價格太高？找我們，BioLegend推出的LEGENDplex?多因子檢測試劑盒，*少只需12.5μL至25μL的樣本量，便可以同時檢測13種指標，方便省時，性價比高，為您提供多種細胞因子同時檢測的優選解決方案。

LEGENDplex? 多因子檢測原理

BioLegend LEGENDplex? 是基于熒光微球技術的**“雙夾心”液相檢測方法，反應原理類似于ELISA檢測。13種微球各自具有不同強度熒光（APC），并依大小分為A、B兩類，分別為6種和7種。微球分別耦連對應指標的捕獲抗體，可捕獲樣品中或標準品中的目標蛋白，經過孵育和洗滌，與加入的檢測抗體形成“雙抗夾心”的三明治結構，再與加入的鏈霉親和素-PE（SA-PE）反應，*后通過檢測流式細胞儀PE和APC通道的信號強度，分別定性微球和定量分析物，并借助廠家提供的免費軟件對數據進行分析。

LEGENDplex? 的特點：

（1）可用于市面多數流式細胞儀

（2）預設panels（Th1/2/17等）、自選 panels 及定制服務可選

（3）免費的數據分析軟件

（4）性價比高，單反應價格低于同類產品

（5）操作靈活，可在96孔板、EP管和真空吸濾板進行反應

試劑盒組成

試劑盒內包含熒光微球（預混或單獨包裝）、生物素標記的檢測抗體、PE熒光素偶聯的鏈霉親和素標記、Assay Buffer 和Washing Buffer等緩沖液，以及96孔可真空抽吸板、dongle。

檢測靈敏度

應用人類輔助性T細胞因子檢測試劑盒分析細胞上清和血漿內的細胞因子為例（Human T Helper Cytokine Panels，Cat. No.740001）

在生物研究領域中的應用

人外周血單核細胞（PBMC）分別用LPS和CD3/CD28刺激2d和4d時間13種細胞因子的表達量（濃度單位：pg/ml）。

常見問題解答（一）

Q：LEGENDplex? 方法適用的流式細胞儀有哪些？

A：可用于絕大多數流式細胞儀，如BD  FACSCalibur? ，BD  FACSCanto? ，BD  FACSCanto?  II ，BDLSR?  I ，BD  LSR? II， BD  LSRFortessa? ， BD  FACSAria?  I、 II 和 III ，請參照說明書的“終端用戶需要準備的材料（ Materials  to  be  provided  by  end-user ）”部分，了解對儀器和通道配置的要求。對于其他品牌流式儀（ Beckman  Coulter、 Guava 等），使用時需要合理設置儀器參數。

Q：LEGENDplex? 和Luminex®兩種實驗方法有什么不同之處？

A：LEGENDplex? 和Luminex®都是基于熒光微球技術，通過形成“雙抗夾心”的三明治結構，來檢測樣本中多種指標含量的**學實驗方法。它們之間*大的不同是數據的收集方式，  LEGENDplex? 通過流式細胞儀完成數據的收集，而Luminex®是通過專門的儀器完成數據收集。相對Luminex®儀器來說，流式細胞儀的分布和使用更加普遍。只要實驗室有可以利用的流式細胞儀，就能開展LEGENDplex? 多因子檢測實驗。LEGENDplex? 也不能在Luminex®的儀器上進行數據收集。

Q：廠家提供的免費分析軟件是否對數據格式有要求？

A：只要流式細胞儀完成數據收集后能夠生成FCS文件格式，通常是FCS2.0，3.0或3.1就可以用  LEGENDplex? 分析軟件進行分析（軟件下載網址：biolegend.com/legendplex/software）。目前版本的軟件只能在安裝Windows 7或Windows 8 (32位或64位)系統的電腦上運行，與XP和Mac系統兼容的版本還在開發中。如果流式細胞儀連接的是Mac系統，需要在數據收集完成后將所有的原始數據（FCS文件）轉移到個人電腦上再進行分析。